由模板设计引物对、检查发夹与二聚体,并算出引物管该复溶到多少体积。
预测一对引物在给定模板上能扩出的全部产物。
用 SOE PCR 融合两个片段,订购引物前先验证重叠区。
由模板序列与目标区域自动设计 PCR 引物对,给出每对的 Tm、GC 含量与产物长度。
使用 Wallace 法则和盐校正公式计算引物熔解温度(Tm),同时给出 GC 含量和长度。
检查引物的发夹结构与二聚体,并在模板上扫描允许错配的非特异结合位点。
计算寡核苷酸的分子量、GC 含量与摩尔消光系数,以及配成 100 µM 所需的水量。
PCR 辅助计算器 —— 估算退火温度、延伸时间、产物质量和循环扩增倍数。