酶活计算器
将吸光度变化速率换算为酶活单位，或在各活性单位间转换。
U/mL = (ΔA/min) ÷ (ε × l)，其中 ε 单位为 mM⁻¹ cm⁻¹，l 为光程（cm）。
每毫升活性
0.016077U/mL
总活性
0.016077
U
比活
—
U/mg
nkat
0.26795
nkat
µkat
2.680e-4
µkat
填入蛋白浓度后可得到比活。
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功能简介
酶活表示酶在单位时间内转化底物的量，可报告为整个样品的总活性，也可报告为每毫克蛋白的比活。最常用的两套单位体系是酶单位 U（定义为每分钟 1 µmol 底物）和 katal（SI 单位，等于每秒 1 mol）。本计算器把基于吸光度的动力学测定与这两套体系衔接起来，让你按所在领域的习惯报告结果。
原理与公式
在速率模式下，每毫升活性为 U/mL = (ΔA/min) ÷ (ε × l)，其中 ε 为摩尔消光系数（mM⁻¹ cm⁻¹），l 为光程（cm）。当 ε 以 mM⁻¹ cm⁻¹ 代入时，结果直接为 µmol/mL/min，即 U/mL，无需再乘 1000。总活性 = U/mL × 反应体积（mL），比活 = U/mL ÷ 蛋白浓度（mg/mL）。在单位模式下，换算关系基于 1 U = 1 µmol/min = 16.667 nkat = 0.016667 µkat，且 1 katal = 6×10⁷ U，1 mU = 10⁻³ U。
演算示例
当 ΔA/min = 0.1、ε = 6.22 mM⁻¹ cm⁻¹（NADH）、光程 1 cm、反应体积 1 mL、蛋白浓度 0.5 mg/mL 时，活性为 0.01608 U/mL，总活性为 0.01608 U。比活为 0.03215 U/mg，折合 0.2680 nkat（0.0002680 µkat）。验证一下：1 U = 16.667 nkat，100 nkat = 6.0 U。
适用场景
当你用分光光度计或酶标仪跟踪吸光度来测定产物生成时（例如 340 nm 处的 NADH 氧化，或 410 nm 处的 pNA 释放），使用速率模式。用比活比较不同批次酶的纯度，用总活性来确定反应或加样规模。当文献或试剂盒用 katal 报告活性而你需要 U，或反之，使用单位模式，使不同方法间的数值可比较。
常见问题
- U 和 katal 之间怎么换算？
- 1 U 等于每分钟 1 µmol 底物，即 1.6667×10⁻⁸ katal，因此 1 katal = 6×10⁷ U。实际换算中，1 U = 16.667 nkat = 0.016667 µkat。把 U 值乘以 16.667 得到 nkat，或把 katal 值除以 6×10⁷ 得到 U。
- 怎样测量 ΔA/min？
- 在分光光度计或酶标仪上以动力学模式运行测定，在固定波长下随时间记录吸光度。对反应曲线早期呈线性的部分做直线拟合，取其斜率作为 ΔA/min。只在线性范围内读取，因为后期底物耗尽、产物抑制或酶失稳都会使曲线弯曲。
- 总活性和比活有什么区别？
- 总活性描述整个样品的活性（U/mL × 体积），会随样品量多少而变化。比活是每毫克蛋白的 U 数，衡量酶的纯度或浓度。一份更纯的制备液比活更高，即使总活性相同。
- ε 该用哪个值？
- 使用你所测波长和产物对应的系数。常用预设为 NADH/NADPH 在 340 nm 处的 6.22、pNA 在 410 nm 处的 8.8，以及 Ellman 试剂生成的 TNB 在 412 nm 处的 14.15，单位均为 mM⁻¹ cm⁻¹。直接以 mM⁻¹ cm⁻¹ 填入即可，公式已按该单位处理为 µmol/mL/min。