细胞接种

细胞接种计算器

按培养器皿面积计算细胞接种密度。

器皿面积: 75 cm²

输入目标密度和母液浓度以计算。

工具描述

细胞接种密度是细胞培养的关键参数,影响细胞生长、分化和实验重复性。本计算器根据培养器皿面积和目标密度计算所需总细胞数,再确定母液细胞悬液体积和需添加的稀释液体积。

使用说明

选择培养器皿(96 孔板、24 孔板、6 孔板、T-75 培养瓶等)。输入目标接种密度(cells/cm²)和母液细胞浓度(cells/mL)。可选输入孔/瓶数量和每孔最终培养基体积,以同时计算稀释液体积。

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功能简介

接种密度是指每单位培养面积的细胞数(cells/cm²)。它决定了细胞贴壁时的拥挤程度,直接影响生长速度、分化能力和实验重复性。合适的密度取决于细胞系与实验目的:常规传代希望第二天达到 20–80% 汇合度,而分化方案往往给定精确密度,因为拥挤程度会直接改变细胞行为。

原理与公式

所需总细胞数 = 目标密度(cells/cm²)× 容器面积(cm²)× 容器数量。所需原液体积 = 总细胞数 ÷ 原液浓度(cells/mL)。稀释液体积 = 终培养基体积 − 原液体积。不同培养板/瓶的面积为固定值(如 6 孔板每孔 ≈ 9.6 cm²,T-75 ≈ 75 cm²)。培养面积务必以器皿厂商说明书为准——不同品牌的「6 孔板」孔底面积有差异(约 9.4–9.6 cm²),误差会线性传导到细胞数上。用台盼蓝计数活率,按活细胞数铺板。

演算示例

以 1×10⁵ cells/cm² 接种 6 孔板。单孔面积约 9.6 cm² → 每孔 9.6×10⁵ 个细胞。若原液浓度为 1×10⁶ cells/mL,则需加 0.96 mL 原液 + 9.04 mL 培养基,配成 10 mL 终体积。若计数显示活率只有 80%,取液体积要除以 0.8:要铺 9.6×10⁵ 个活细胞,需要 1.2 mL 的 1×10⁶ cells/mL 细胞悬液。

适用场景

用于细胞传代、搭建转染或分化实验、在同等融合度下比较处理组,以及标准化重复间的接种条件。对 96 孔板实验同样适用——单孔面积小(约 0.32 cm²),移液误差占比更大;在不同孔板规格之间放大实验时也用它换算。

常见问题

计算器使用哪些容器面积?
采用标准培养耗材面积:96 孔板每孔 ≈ 0.32 cm²、24 孔板 ≈ 1.9 cm²、12 孔板 ≈ 3.8 cm²、6 孔板 ≈ 9.6 cm²、T-25 ≈ 25 cm²、T-75 ≈ 75 cm²、T-175 ≈ 175 cm²。从列表选择容器后面积会自动套用。
如何由密度计算总细胞数?
总细胞数 = 目标密度(cells/cm²)× 容器面积(cm²)× 容器数量。以 6 孔板、1×10⁵ cells/cm² 为例,每孔需 9.6×10⁵ 个细胞。
如何算出所需原液体积?
原液体积 = 所需总细胞数 ÷ 原液浓度(cells/mL)。若需 9.6×10⁵ 个细胞、原液浓度为 1×10⁶ cells/mL,则取 0.96 mL 原液。
为什么接种密度很重要?
它决定细胞达到融合的快慢及其行为。过密会衰老或分化,过稀则生长停滞。在各重复间保持一致密度,才能保证实验可比。