细胞培养计算器
细胞培养计算器
细胞计数、接种体积、分瓶比例和细胞活力计算。
公式：cells/mL = (计数 ÷ 格数) × 稀释倍数 × 10⁴
输入所需数值以计算。
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功能简介
细胞培养计算器处理哺乳动物细胞培养中的日常计算：用血球计数板计数细胞、计算接种目标细胞数所需的悬液体积、推导传代分瓶比例，以及通过台盼蓝排斥法测定细胞活力。细胞生物学家、生物技术实验员以及所有维持贴壁或悬浮细胞系的人都会用到它。
原理与公式
血球计数板公式为 cells/mL =（计数 ÷ 格数）× 稀释倍数 × 10⁴，其中 10⁴ 系数将一格 0.1 立方毫米的计数体积换算为 1 毫升。接种体积 = 目标细胞数 ÷ 母液浓度（cells/mL）。分瓶比例由目标密度 ÷ 当前密度决定，例如当前融合度 90%、重悬后目标 30% 即为 3:1 分瓶；原则是保留 1 份细胞，加入（比例 − 1）份新鲜培养基。活力 = 活细胞 ÷（活细胞 + 死细胞）× 100%，来自台盼蓝计数。
演算示例
在 1:1 台盼蓝稀释（稀释倍数 2）下，你数了 4 个计数格共 250 个细胞。浓度 =（250 ÷ 4）× 2 × 10⁴ = 1.25×10⁶ cells/mL。若要在孔中接种 5×10⁵ 个细胞，母液体积 = 5×10⁵ ÷ 1.25×10⁶ = 0.4 毫升。若培养瓶融合度 90%、希望传代后降到 30%，分瓶比例 = 90 ÷ 30 = 3，即保留三分之一细胞并加入 2 倍体积的培养基。
适用场景
研究者用它在药物筛选前统一 96 孔板的接种量，在传代汇合的 T-75 培养瓶时计算应加的培养基体积，以及在开始实验前通过活力检测确认冻存复苏后细胞活力高于 90%。
常见问题
- HEK293 细胞应该用多少接种密度？
- HEK293 通常按 2×10⁵ 至 3×10⁵ cells/cm² 接种以获得快速增殖；但转染前多数方案会提前一天接种 1×10⁵ 至 1.5×10⁵ cells/cm²，使其达到 70–90% 融合度。可用接种体积模式，输入母液浓度和目标细胞数来计算。
- 怎么用血球计数板计算细胞浓度？
- 数四角和中央大方格中的细胞，套用公式 cells/mL =（计数 ÷ 格数）× 稀释倍数 × 10⁴。该公式已计入计数方格 0.1 立方毫米的体积和所用稀释倍数。
- 细胞传代时怎么算分瓶比例？
- 用当前融合度（或密度）除以目标重悬融合度。例如 90% 降到 30% 即 3:1 分瓶；保留 1 份细胞悬液，加入 2 份新鲜培养基。计算器按 分瓶比例 = 当前密度 ÷ 目标密度 计算。
- 怎么用台盼蓝算细胞活力？
- 将细胞与台盼蓝 1:1 混合（稀释倍数 2），分别计数活细胞（未着色）和死细胞（着色），活力 = 活细胞 ÷（活细胞 + 死细胞）× 100%。健康悬液通常高于 90%。