缓冲液配方计算器
标准缓冲液配方按任意体积缩放,支持工作液或母液。
用量 = 每升参考用量 × (体积_mL / 1000) / 母液倍数。选择母液时倍数为 1。
终体积
1000mL
成分用量
NaCl8 g
KCl0.2 g
Na₂HPO₄1.44 g
KH₂PO₄0.24 g
加去离子水定容至 1000 mL。
在工作温度下调 pH,再用水定容至终体积。若需无菌,用 0.22 µm 滤膜过滤除菌;HEPES 需避光保存。
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功能简介
缓冲液配方通常以每升母液的用量给出,而日常实验往往需要不同体积,还经常要用工作液。手工换算容易出错,尤其是克与毫升混用、或倍数比较特殊(如 50×)的配方。本工具对整个配方施加同一个缩放系数,保证各成分比例不变,并把容易混淆的两件事分开:稀释母液,以及定容到终体积。
适用场景
可用于配制细胞实验用 PBS、电泳与洗涤用 TAE 或 TBS、DNA 保存用 TE、杂交用 SSC,以及生化实验用 HEPES 或 Tris-HCl。当方案在体积之间切换时也很实用,例如从 1 L 瓶改成 500 mL 滤器,或临时从 10×、50× 母液配 1× 缓冲液。
常见问题
- 如何用 10× 母液配方配制 1× 工作液?
- 先把每升母液的各成分用量除以母液倍数,再按终体积缩放。例如用 10× 配方配 500 mL 1× PBS,缩放系数为 0.5 L / 10 = 0.05,80 g NaCl 变为 4 g。选择工作液选项后计算器会自动完成这一步。
- 调 pH 应该在定容之前还是之后?
- 尽量在定容前用浓酸或浓碱调 pH,然后再加水至刻度。Tris 和磷酸缓冲液的 pH 会随稀释和温度变化,因此建议先让溶液在工作温度下平衡,再做最终调节。
- 这些缓冲液可以高压灭菌还是需要过滤除菌?
- PBS、TBS、TE、SSC 可以耐受高压灭菌;TAE 以及含 Tris 的溶液建议用 0.22 µm 滤膜过滤除菌,以避免体积损失和 pH 漂移。HEPES 见光易分解,应避光保存。
- 为什么 TAE 配方里有些成分是毫升?
- 50× TAE 使用冰乙酸和 0.5 M EDTA 母液,两者都是液体,因此用量以毫升计而不是克。计算器会保留每个成分原本的单位,不会强行统一换算成克。